พ่อตาปืนโต ตอน สาวกำนันพันธุ์ดุ เรื่องราวของ กำนันเสือ หรือ น้ำเพชร (รับบทโดย ญาณิศา ธีราธร) ที่ดูแลตำบลดอนรักด้วยความตั้งใจ เอาใจใส่ความทุกข์ยากของชาวบ้าน จนตำบลดอนรักสงบสุข ไร้อาชญากรรมมาหลายปี กระทั่งวันหนึ่งกลุ่มโจรหน้ากากเหล็กได้บุกปล้นรถขนเงินอย่างอุกอาจ แม้จะถูกกำนันเสือ และ กำนันช้าง หรือ คเชนทร์ (รับบทโดย พูลภัทร อัตถปัญญาพล) แห่งตำบลดอนระทม ช่วยสกัดจับ แต่สุดท้ายกลุ่มโจรหน้ากากเหล็กก็ปล้นเงิน 100 ล้านไปได้สำเร็จ

ชยา (รับบทโดย พลพจน์ พูลนิล) ญาติของกำนันช้าง หลานเจ้าของบริษัทรักษาความปลอดภัย จึงถูกส่งมาตามหาเงิน 100 ล้าน โดยมีเงื่อนไขว่าหากชยาตามเงิน 100 ล้านกลับมาไม่ได้ภายใน 2 เดือน ห้ามกลับมาเหยียบที่บริษัทเด็ดขาด

ต่อมา ขุนพล (รับบทโดย วรากร ศวัสกร) เดินทางมารับตำแหน่งนายอำเภอคนใหม่ โดยที่ยังไม่เปิดเผยตัวว่าเขาคือใคร เพื่อความปลอดภัย และต้องการสืบหาคนร้ายที่ฆ่า นายอำเภอเขมกร (รับบทโดย พลรัตน์ รอดรักษา) พ่อของเขา เพราะหลังจากที่นายอำเภอเขมกรตายในหน้าที่ ต่อมาก็มีนายอำเภออีกหลายคนเสียชีวิตอย่างปริศนา ขุนพลมั่นใจว่าคนร้ายที่ฆ่านายอำเภอทุกคนคือคนเดียวกัน

ขุนพลเริ่มสืบคดีการตายของพ่อและนายอำเภออีกหลายคน โดยตั้งเป้าไปที่ครอบครัวของกำนันเสือ เขาพยายามเข้าไปตีสนิทกำนันเสือ โดยมีเพื่อนรุ่นพี่คู่หูอย่างกำนันช้าง ที่กำลังแอบคบหากับ น้ำมนต์ (รับบทโดย สุพิชฌาย์ ศรีสวัสดิ์) และมีชยาที่กำลังแอบคบกับ น้ำเหนือ (รับบทโดย กัญณัฐสินี ทรัพย์มี) น้องสาวของกำนันเสือ ช่วยเป็นสะพานเชื่อมให้ แต่ทั้งสามหนุ่มก็ต้องเจอฤทธิ์ความหวงลูกสาวของ คุณทิพย์ (รับบทโดย นาตยา จันทร์รุ่ง) แม่ของทั้งสามสาว และอาการหวงน้องสาวของกำนันเสือ เพราะกำนันเสือกินแหนงแคลงใจว่ากำนันช้างเป็นพ่อม่ายลูกติด ส่วนชยาก็ไร้น้ำยา ทั้งคุณทิพย์และกำนันเสือจึงขวางหนุ่ม ๆ ทุกรูปแบบ จนสามหนุ่มแทบเอาตัวไม่รอด แต่ทั้งสามหนุ่มก็ไม่ยอมแพ้ เพราะมี นิด (รับบทโดย นียดา ศรีบุญสม) พี่เลี้ยงของน้ำมนต์กับน้ำเหนือ คอยช่วยเป็นแม่สื่อให้

ความสวยของน้ำมนต์ กับน้ำเหนือ น้องสาวของกำนันเสือ เป็นที่เลื่องลือ มีหนุ่ม ๆ หมายปองมากมาย ทุกครั้งที่สองสาวไปขายผลไม้ในตลาดก็จะถูกหนุ่ม ๆ รุมจีบ หนึ่งในนั้นคือ คุณชายเม้ง (รับบทโดย นวบดินทร์ สัณหวัณภัคดี) ลูกชาย เสี่ยกวง (รับบทโดย วรธนพจน์ ตันติวิริยางกูร) ผู้ทรงอิทธิพลของดอนระทม แต่คุณชายเม้งมีคู่หมั้นอยู่แล้วคือ ดารณี (รับบทโดย พัชรวลัย พงษ์ภมร) ลูกสาว เจ้าพ่อเดชา (รับบทโดย พงศนารถ วินศิริ) ซึ่งดารณีก็หึงหวงคุณชายเม้งอย่างออกนอกหน้า จนมีเรื่องกับน้ำเหนือที่ตลาดอยู่เสมอ

ขณะที่คุณชายเม้งตามจีบน้ำเหนือ ผู้ใหญ่เหี้ยม (รับบทโดย สุรศักดิ์ โชติทินวัฒน์) ก็พยายามจีบน้ำมนต์ เพราะเขาชอบเธอมาก แต่อีกเหตุผลหนึ่งคือ ผู้ใหญ่เหี้ยมต้องการครอบครองที่ดินของกำนันเสือ ซึ่งอยู่ติดกับที่ดินของเขา เพื่อนำที่ดินของกำนันเสือมาขายให้เจ้าพ่อเดชา เจ้านายของเขา เพราะเจ้าพ่อเดชาต้องการที่ดินกำนันเสือ เพื่อสร้างโรงงานผลิตก๊าซธรรมชาติและน้ำมัน

นอกจากที่ดินของกำนันเสือแล้ว เจ้าพ่อเดชายังต้องการสร้างความยิ่งใหญ่ในอำเภอ เขาจึงยุให้ผู้ใหญ่เหี้ยมที่อยากเป็นกำนัน ส่งคนไปเล่นงานพวกกำนันช้างกับกำนันเสืออยู่เสมอ โดยที่ผู้ใหญ่เหี้ยมไม่รู้เลยว่าเจ้าพ่อเดชาไม่คิดจะยกตำแหน่งให้เขาจริง ๆ แต่เจ้าพ่อเดชาหลอกใช้ทุกคนเพื่อสร้างอิทธิพลคุมทั้งดอนระทม เลยไปถึงดอนรักของกำนันเสือด้วย

ขุนพล กำนันเสือ กำนันช้าง และชยา จะทำภารกิจตามหาเงิน 100 ล้านสำเร็จหรือไม่ และนายอำเภอคนใหม่อย่างขุนพล ที่ได้รับความร่วมมือจากสองกำนัน จะปกป้องอำเภอจากเงื้อมมือผู้ทรงอิทธิพลอย่างเจ้าพ่อเดชาได้อย่างไร ติดตามชมกันต่อได้ในละคร พ่อตาปืนโต ตอน สาวกำนันพันธุ์ดุ